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| 目的通过ProteOn XPR36检测牛磺熊去氧胆酸钠（TUDCA-Na）与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用。方法把BSA通过氨基偶联在GLH芯片表面,优化TUDCA—Na与BSA的相互作用条件,获取二者相互作用的结合常数（ka）、解离常数（kd）,并通过计算kd/ka的比值,得出二者的平衡常数（KD）。结果通过优化后,用pH为4的10 mM醋酸钠配制300 nM BSA蛋白,偶联时间为5min,最终BSA蛋白的偶联量达11 000 RU左右。TUDCA—Na溶液以100、50、25、12.5、6.25、0 M的梯度浓度和BSA发生相互作用,互作的流速为30μL/min,结合和解离时间分别为80 s和60 s,最终选用Langmuir模型进行拟合,ka为2.35×104 1/Ms;kd为1.29 1/s。结论TUDCA-Na与BSA蛋白间存在相互作用,二者的平衡常数为5.47×10-5M。 |
| 关键词: TUDCA-Na BSA 相互作用 表面等离子共振技术 |
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| 基金项目:福建省卫生厅青年科研项目（2014-2-29）；?福建省自然科学基金项目（2015J01687）； |
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